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某天，一具被钓鱼迷意外发现的尸体送到大学医学部法医学副教授桐山准（松下奈绪饰）面前。经过细致的解剖分析，桐山推翻了刑警村上卫（松重丰饰）等人关于意外溺水的论断，认为这个名叫笠井和磨（笠原秀幸饰）的年轻人很可能死于他杀。此前笠井因杀害女友入狱服刑，刚出狱不久便遭杀害，警方一致将嫌疑人锁定在笠井的同窗兼情敌远山俊平（柏原收史饰）的身上。谁知未过多久，远山也死于非命。在此期间，志愿成为救死扶伤医者的医学院大四学生犬饲一（横山裕饰）被分到桐山麾下实习。从最初的扭扭捏捏、各种不解，到后来亲眼目睹桐山教授一丝不苟的工作场面，他对“尸活师”这一神秘称谓有了全新的认识…… 本片根据杜野亚希的同名漫画改编。。城中村有一家只在深夜开业的小理发店。理发师毛头,年龄不详,身份不明,是一个工作时总戴着猫头鹰头套的怪人。 毛头大部分时候都很懒散无拘束,标志性的穿着是上身正装下身裤衩。他手艺很差,剪不出好看的发型常常怪罪于客人颜值不够。 来理发的客人不多,身上故事却不少。熟客里有最擅长让尸骨“开口说话”的法医刘八百和廖小刀、办案总是办到熟人身上的民警蒋述,和经历过上百个罪案的律师刘焱……. 比起做生意挣钱,毛头更热衷于成为故事的搜集者。这些真实故事影响着毛头,让他理解人性和生活。现在他将这些故事带给更多人,帮助更多人认识活着意义和寻找人生价值。 《毛头的深夜理发店》发布的所有内容都是原创动画，改编自非虚构的职业故事、真实案件、真实经历，并且均已获讲述者授权。。1938年春，日本陆军名记者秋山和美随日军进入中国，报导日军作战进程。一夜，她参加西班牙驻沪领事夫人晚宴，在回家途中遇刺受伤，被日军情报官中村谦一搭救。和美伤愈回家，父亲秋山泓教授指责她报导失实。她的中国母亲陈婉似更是悲愤。和美得知日军在南京的暴行，大受震撼。此时，她的小学同学新井庆子和一批日本及韩国女子来到上海，又匆匆坐军车离去，使她迷惑不解。新井庆子等人是日本陆军的慰安妇。和美经过艰难的调查采访，终于掌握了慰安所的秘密，了解了慰安妇的悲惨命运，使她对日军的战争宣传改变了观点，并写出了长篇报道文章《地狱中的慰安妇》。中村谦一负责保护和监视和美，他冷酷的外表中隐藏着对她的爱。中村劝和美不要玩火自焚，并向她坦露心迹。情报部主管川崎少将侦知中村徇情渎职，将中村关了禁闭，另派坂田大尉监视和美。抗日组织获悉和美写了揭露日军慰安妇内幕的爆炸性新闻稿，便设法通过和美的表妹陈美玲和陈婉似将稿子转出来。不料中了坂田的埋伏，陈美玲逃脱，陈婉似被捕，被折磨致死。秋山泓自杀身亡。中村逃出牢狱，冒死救出和美，遭到坂田追杀，和美重落川崎魔掌。她遭到强奸后被送往慰安所。中村九死一生，被新四军所救。和美在慰安所受尽非人折磨，她忍辱负重，写下了记录慰安妇命运的稿子《地狱究竟有几层》。抗日组织向日军发起猛攻，中村冲入慰安所去救和美，但和美已因患梅毒被送往731细菌部队。中村焚毁了慰安所，与川崎搏斗，最终同归于尽。。
